徐潮¹ , 李亮^1,2 , 金芜军^1,2 , 宛煜嵩^1,2

1 中国农业科学院生物技术研究所, 北京, 100081;
2 农业部转基因植物用微生物环境安全监督检验测试中心(北京), 北京, 100081
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12卷, 第 5 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000875
收稿日期: 2014年03月31日    接受日期: 2014年08月19日    发表日期: 2014年09月15日

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推荐引用：

Xu C., Li L., Jin W.J., and Wan Y.S., 2014, Event-specific Real-time RPA Detection of Transgenic Rice Kefeng 6, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(5): 875-880 (徐潮, 李亮, 金芜军, 宛煜嵩, 2014, 荧光RPA技术检测转基因水稻科丰6号, 分子植物育种, 12(5): 875-880)

目前转基因作物检测通常使用PCR检测方法，PCR检测耗时较长且需要精密控制温度循环的仪器，不适于现场检测。本研究应用重组酶聚合酶等温扩增技术(recombinase ploymerase amplification, RPA)，根据转基因抗虫水稻科丰6号插入连接区整合序列设计筛选了一套可用于RPA检测的引物及探针组合，建立了转基因抗虫水稻科丰6号及其衍生品种转化体特异性荧光RPA检测方法。研究结果表明本方法可稳定特异检出样品中500个拷贝的靶标分子，利用实时荧光检测简化了检测程序，使检测可在10~20 min内完成，与常规PCR检测需要数小时相比极大地缩短了检测时间。使用锂电池驱动的便携式扩增检测仪，对于野外转基因现场检测具有极大的应用价值。

RPA； 等温扩增；科丰6号；转基因检测